drd2_human

NAME

6CM4

ORGANISM

Human (Homo sapiens)

PROTEIN NAME

drd2_human

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
D
P
L
N
L
S
W
Y
D
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
D
D
L
E
R
Q
N
W
S
R
20
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
P
F
N
G
S
D
G
K
A
D
30
 
 
 
 
            
TM1              
R
P
H
Y
N
Y
Y
A
T
L
40
                   
                   
L
T
L
L
I
A
V
I
V
F
50
                   
                   
G
N
V
L
V
C
M
A
V
S
60
                   
    ICL1 TM2  
R
E
K
A
L
Q
T
T
T
N
70
                   
                   
Y
L
I
V
S
L
A
V
A
D
80
                   
                   
L
L
V
A
T
L
V
M
P
W
90
                   
                   
V
V
Y
L
E
V
V
G
E
W
100
                   
ECL1 TM3      
K
F
S
R
I
H
C
D
I
F
110
                   
                   
V
T
L
D
V
M
M
C
T
A
120
 
 
                
                   
S
I
L
N
L
C
A
I
S
I
130
                   
                   
D
R
Y
T
A
V
A
M
P
M
140
                   
ICL2 TM4      
L
Y
N
T
R
Y
S
S
K
R
150
                   
                   
R
V
T
V
M
I
S
I
V
W
160
                   
                   
V
L
S
F
T
I
S
C
P
L
170
                   
      ECL2      
L
F
G
L
N
N
A
D
Q
N
180
                   
          TM5    
E
C
I
I
A
N
P
A
F
V
190
                   
                   
V
Y
S
S
I
V
S
F
Y
V
200
                   
                   
P
F
I
V
T
L
L
V
Y
I
210
                   
                   
K
I
Y
I
V
L
R
R
R
R
220
   
 
 
 
 
 
 
 
 
            ICL3
K
R
V
N
T
K
R
S
S
R
230
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
A
F
R
A
H
L
R
A
P
L
240
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
K
G
N
C
T
H
P
E
D
M
250
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
K
L
C
T
V
I
M
K
S
N
260
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
S
F
P
V
N
R
R
R
V
270
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
E
A
A
R
R
A
Q
E
L
E
280
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
M
E
M
L
S
S
T
S
P
P
290
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
E
R
T
R
Y
S
P
I
P
P
300
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
H
H
Q
L
T
L
P
D
P
310
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
H
H
G
L
H
S
T
P
D
320
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
P
A
K
P
E
K
N
G
H
330
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
A
K
D
H
P
K
I
A
K
I
340
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
F
E
I
Q
T
M
P
N
G
K
350
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
T
R
T
S
L
K
T
M
S
R
360
 
                  
  TM6            
R
K
L
S
Q
Q
K
E
K
K
370
       
 
      
 
  
                   
A
T
Q
M
L
A
I
V
L
G
380
                   
                   
V
F
I
I
C
W
L
P
F
F
390
                   
                   
I
T
H
I
L
N
I
H
C
D
400
                   
ECL3 TM7      
C
N
I
P
P
V
L
Y
S
A
410
                   
                   
F
T
W
L
G
Y
V
N
S
A
420
                   
                   
V
N
P
I
I
Y
T
T
F
N
430
                   
H8                
I
E
F
R
K
A
F
L
K
I
440
     
    C-term
L
H
C
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
hemagglutin
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG            
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10)      
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TEV proteas
 
                  
  TM1            
 
N
Y
Y
A
T
L
L
T
L
43
                   
                   
L
I
A
V
I
V
F
G
N
V
53
                   
                   
L
V
C
M
A
V
S
R
E
K
63
                   
ICL1 TM2      
A
L
Q
T
T
T
N
Y
L
I
73
                   
                   
V
S
L
A
V
A
D
L
L
V
83
                   
                   
A
T
L
V
M
P
W
V
V
Y
93
                   
          ECL1  
L
E
V
V
G
E
W
K
F
S
103
                   
TM3              
R
I
H
C
D
I
F
V
T
L
113
               
 
  
                   
D
V
M
M
C
T
A
S
A
L
123
                   
                   
N
L
C
A
I
S
I
D
R
Y
133
                   
          ICL2  
T
A
V
A
M
P
M
L
Y
N
143
                   
TM4              
T
R
Y
S
S
K
R
R
V
T
153
                   
                   
V
M
I
S
I
V
W
V
L
S
163
                   
                   
F
T
I
S
C
P
L
L
F
G
173
                   
ECL2            
L
N
N
A
D
Q
N
E
C
I
183
                   
    TM5          
I
A
N
P
A
F
V
V
Y
S
193
                   
                   
S
I
V
S
F
Y
V
P
F
I
203
                   
                   
V
T
L
L
V
Y
I
K
I
Y
213
                 
 
                   
I
V
L
R
R
R
R
K
R
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lysozyme
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
               
TM6          
K
L
S
Q
Q
K
E
K
369
         
 
      
 
                   
K
A
T
Q
M
A
A
I
V
A
379
                   
                   
G
V
F
I
I
C
W
L
P
F
389
                   
                   
F
I
T
H
I
L
N
I
H
C
399
                   
ECL3 TM7      
D
C
N
I
P
P
V
L
Y
S
409
                   
                   
A
F
T
W
L
G
Y
V
N
S
419
                   
                   
A
V
N
P
I
I
Y
T
T
F
429
                   
H8                
N
I
E
F
R
K
A
F
L
K
439
       
      C-term
I
L
H
C
443

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term
 
 
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
ECL1
 
 
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
ECL2
 
 
 
TM5
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ICL3
 
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
hemagg
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TEV pr
 
 
 
 TM1
 
ICL1
 
TM2
 
ECL1
 
 
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
ECL2
 
 
TM5 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lys
 
 
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8


DIAGRAMS

ICL1 K A L Q ICL1ECL1 E W K F ECL1ICL2 P M L Y N ICL2ECL2 L N N A D Q N E C I I A ECL2ICL3 R S S R A F R A H L R A P L K G N C T H P E D M K L C T V I M K S N G S F P V N R R R V E A A R R A Q E L E M E M L S S T S P P E R T R Y S P I P P S H H Q L T L P D P S H H G L H S T P D S P A K P E K N G H A K D H P K I A K I F E I Q T M P N G K T R T S L K T M S R R ICL3ECL3 D C N I ECL3N-term M D P L N L S W Y D D D L E R Q N W S R P F N G S D G K A D N-termC-term C C-term R P H Y N Y Y A T L L T L L I A V I V F G N V L V C M A V S R E T T T N Y L I V S L A V A D L L V A T L V M P W V V Y L E V V G S R I H C D I F V T L D V M M C T A S I L N L C A I S I D R Y T A V A M T R Y S S K R R V T V M I S I V W V L S F T I S C P L L F G N P A F V V Y S S I V S F Y V P F I V T L L V Y I K I Y I V L R R R R K R V N T K K L S Q Q K E K K A T Q M L A I V L G V F I I C W L P F F I T H I L N I H C P P V L Y S A F T W L G Y V N S A V N P I I Y T T F N I E F L K F R K A I L H

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated
122 |  I A
375 |  L A
379 |  L A

DELETIONS

  • from 1 to 34
  • from 223 to 361

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: signal

    Name: hemagglutinin
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_0 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: FLAG
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_1 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: His(10)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_2 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: prot_cleavage

    Name: TEV protease
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_3 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: fusion

    Name: T4 Lysozyme (T4L)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_4 223:361
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Sf9 Insect Bac - to - Bac Baculovirus Expression System (Invitrogen)

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DDM 1 %w/v
    additive CHS 0.2 %w/v

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    Proteolysis by TEV protease None
    Deglycosylation by PNGase F None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: in meso/LCP
    TYPE: lipidic cubic phase (monoolein (9.9 MAG))
    PROTEIN CONCENTRATION: 60.0 mg/ml
    Temperature: 20°C
    ph : 7.8-7.8

    Remarks:

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Detergent
    Detergent DDM 0.05 %v/v
    Lipid
    Lipid CHS 0.01 %v/v
    Additional
    Buffer Tris/HCl pH 7.8 100.0 mM
    Additional lithium nitrate 230.0 mM
    Additional PEG 400 25.0 %v/v
    Additional (±)1,3-butanediol 4.0 %